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『簡體書』分子生物学检测技术(李晓红)

書城自編碼: 4152009
分類:簡體書→大陸圖書→教材高职高专教材
作者: 李晓红、句荣辉 主编
國際書號(ISBN): 9787122482518
出版社: 化学工业出版社
出版日期: 2025-09-01

頁數/字數: /
書度/開本: 16开 釘裝: 平装

售價:HK$ 52.8

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內容簡介:
本书主要介绍了分子生物学在食品领域的应用及分子生物学实验基础知识、核酸的结构与功能、核酸分离与纯化等基础知识,进而介绍了分子生物学经典技术—基因扩增检测技术和重组DNA技术相关理论知识以及酶联免疫和蛋白质分析技术。本书实践部分采用“一体式串联”法,以玉米转基因成分检测为主线,将玉米DNA提取、核酸电泳、核酸纯度检测和PCR检测转基因成分甚至荧光定量PCR测抗除草剂pat基因表达量串联起来,知识衔接紧密,提高技能学习效率。重组DNA技术类实验,将pat基因转入大肠杆菌,构建重组菌株,然后进行重组菌株的筛选、外源蛋白的表达检测等实验串联起来,作为转基因植物的上游操作实验,可以让学生很系统地掌握重组DNA技术的相关知识和操作技能,理解基因工程操作的整个过程。在本书的指导下进行教学,可实现一个学期完成一项较为完整的基因检测项目和构建出一个转基因菌株的成果。
目錄
绪论 001
一、分子生物学发展简史 001
二、分子生物学的概念和研究内容 011
三、分子生物学实验基础知识 014
知识小结 020
能力测验 020
模块一 核酸分离纯化技术 022
项目一 基因组DNA的提取与纯化 023
知识 023
一、DNA的结构 023
二、DNA的理化性质 026
三、DNA的提取与鉴定保存 026
技能训练 032
实训1 玉米基因组DNA的分离与纯化 032
实训2 琼脂糖凝胶电泳检测 035
知识小结 037
能力测验 038
项目二 RNA的提取与纯化 039
知识 039
一、RNA的结构 039
二、RNA的种类 040
三、RNA的提取 043
技能训练 046
实训3 玉米总RNA的分离与纯化 046
知识小结 049
能力测验 049
项目三 质粒的提取与纯化 051
知识 051
一、质粒 051
二、质粒的抽提和检测 052
技能训练 054
实训4 大肠杆菌质粒DNA的分离与纯化 054
知识小结 058
能力测验 058
模块二 基因扩增检测技术 061
项目一 聚合酶链式反应 062
知识 062
一、PCR技术基本原理 063
二、PCR反应体系与反应条件 064
三、PCR扩增产物分析 068
四、PCR常见问题 068
技能训练 069
实训5 PCR法检测玉米中的转基因成分 069
知识小结 073
能力测验 074
项目二 荧光定量PCR技术 075
知识 075
一、荧光定量PCR技术基本原理 076
二、荧光标记方式 078
三、模板的定量方式 080
四、荧光定量PCR常见问题 081
技能训练 083
实训6 荧光定量PCR法检测大豆中的转基因成分 083
知识小结 086
能力测验 087
模块三 重组DNA技术 090
项目一 重组DNA的常用载体和工具酶 091
知识 091
一、常用的分子克隆载体 091
二、分子克隆使用的工具酶 101
技能训练 110
实训7 限制性核酸内切酶酶切 110
实训8 DNA的连接 113
知识小结 114
能力测验 115
项目二 重组DNA的基本步骤 117
知识 117
一、目的基因的制备 118
二、选择、构建载体 119
三、连接载体与目的基因 119
四、将重组DNA导入宿主细胞 120
五、重组DNA分子的筛选与鉴定 121
六、外源基因的表达、分离与纯化 122
技能训练 123
实训9 重组质粒DNA分子转入大肠杆菌 123
实训10 蓝白斑法筛选重组菌 125
知识小结 127
能力测验 128
模块四 ELISA技术 129
项目 酶联免疫反应的基本原理和操作 130
知识 130
一、ELISA基本原理 130
二、ELISA类型 132
三、ELISA酶与底物 136
四、ELISA操作要点 137
五、ELISA反应条件的选择 142
技能训练 143
实训11 ELISA检测转基因植物及其产品中CP4 EPSPS蛋白 143
知识小结 147
能力测验 148
模块五 蛋白质分离、纯化与分析技术 149
项目 蛋白质的分离与纯化技术 150
知识 150
一、蛋白质的理化性质 150
二、蛋白质的分离纯化方法及其原理 151
三、蛋白质的凝胶电泳技术 156
技能训练 164
实训12 聚丙烯酰胺凝胶电泳 164
【知识拓展】 蛋白质印迹技术(Western blotting) 167
一、Western印迹技术的基本原理 167
二、Western印迹技术的基本操作 167
知识小结 172
能力测验 172
参考文献 174
內容試閱
分子生物学是生命科学中充满探索魅力的学科。我们置身于成千上万的分子世界中遨游,好像沧海一粟。自20世纪60年代以来,分子生物学迅猛发展,人们经历了探索—发现—应用的历程。每一次重大的发现和突破,无不凝聚了科学家们的智慧和勤奋。目前,针对高职类院校的分子生物学检测技术相关的教材相对较少,且偏向于医学检验方面。本教材本着“必需、够用”的原则,紧密对接高职高专食品生物技术类专业的人才培养目标,以分子生物学理论和技术的应用案例为载体,旨在激发学生学习兴趣,掌握分子生物学的理论知识和操作技能,培养食品安全检测、生物检测、环境检测等领域的高素质技能型人才。
本教材以食品中转基因成分的检测为切入点,引入分子生物学基础知识,同时以此为项目任务。如以玉米转基因成分检测为主线,将玉米DNA提取、核酸凝胶电泳、核酸纯度检测和PCR技术检测转基因成分甚至荧光定量PCR技术检测外源基因含量串联起来,上个实验的结果是下个实验的原材料,环环相扣,这样可有效避免学生草率完成实验任务不顾结果的现象。再如重组DNA技术类实验,将外源基因转入大肠杆菌,构建重组菌株,然后进行重组菌株的筛选、外源蛋白的表达检测等,可以让学生系统地掌握重组DNA技术的相关知识和操作技能。在本书的指导下进行教学,可实现一个学期完成一项较为完整的检测项目和构建出一个转基因菌株。教材以分子生物学检测工作过程系统化为出发点,以国家检测标准为参照,构建了5个技术模块,每个技术模块以真实岗位任务引入教学内容,提出科学问题,激发学生学习兴趣;以知识链接环节拓宽学生的知识面,增强阅读性;以课堂活动环节活跃课堂气氛,增强师生互动;实训环节以真实案例“任务驱动式”展开,每个任务都设有“任务实施”,使任务执行过程更加明晰,考核评价环节更加体现过程考核和以学生为主体的教学理念。同时,本书为扩大学生在分子生物学检测应用的知识面,设置了知识拓展、技能拓展等内容,体现了“以就业为导向,以能力为核心”,实现职业教育教学过程与工作过程融合,培养高素质技能型人才的指导思想,为学生以后走上工作岗位打下坚实的基础。
本教材力争以简明的方式图文并茂地阐述分子生物学基础知识和实验原理,让学生在学会操作技能的同时,不仅能“知其然”,还能“知其所以然”,将检测原理与检测技能相结合,突出岗位职业能力的培养。
本教材由校企人员共同编写。绪论部分由徐瑗聪、李晓红、夏凯编写;模块一由覃鸿妮编写;模块二由李晓红、鞠守勇、句荣辉编写;模块三由杨俊峰编写;模块四由薛香菊编写;模块五由杨洋编写;实训部分由李晓红、朱鹏宇编写;文字校对由句荣辉完成。全书由李晓红统稿,中国农业大学许文涛教授和北京农业职业学院田锦教授主审。编写过程中,借鉴和参考了很多专家学者的研究成果,在此表示诚挚的谢意!
本书编者水平有限,编写时间仓促,书中内容难免有疏漏之处,敬请各位读者批评指正。
编者

 

 

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