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內容簡介: |
《园艺分子生物学实验技术》是在1995年为研究生开设的“现代生物技术”课程的基础上,吸收了生物技术发展的新技术与内容,最终编写而成的。《园艺分子生物学实验技术》共分12章,以园艺作物为研究对象,系统地介绍了核酸分离提取技术、基因克隆及表达分析技术、电泳及目的基因克隆测序、DNA分子标记技术、分子杂交技术、差异表达基因筛选技术、基因功能研究技术、基因调控研究技术、CRISPR/Cas9基因组编辑技术、细胞工程技术、转基因研究技术和植菌互作研究的可视化技术等的原理、方法与应用。
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目錄:
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目录第1章核酸分离提取技术11.1脱氧核糖核酸(DNA)的分离提取11.2核糖核酸(RNA)的分离提取4第2章基因克隆及表达分析技术82.1聚合酶链式反应(PCR)技术82.2cDNA末端快速扩增法(RACE)102.3启动子染色体步移法132.4实时荧光定量PCR技术17第3章电泳及目的基因克隆测序213.1高等植物DNA琼脂糖凝胶电泳213.2目的基因DNA片段回收与载体连接223.3大肠杆菌感受态细胞制备243.4DNA转化与重组克隆筛选鉴定25第4章DNA分子标记技术274.1随机扩增多态性DNA(RAPD)分子标记274.2限制性片段长度多态性(RFLP)分子标记294.3扩增片段长度多态性(AFLP)分子标记324.4相关序列扩增多态性(SRAP)分子标记364.5简单序列重复(SSR)分子标记394.6单核苷酸多态性(SNP)分子标记414.7分子标记辅助选择技术44第5章分子杂交技术475.1DNA印迹法475.2RNA印迹法515.3SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质545.4蛋白质印迹法595.5原位杂交64第6章差异表达基因筛选技术726.1植物mRNA差异显示技术726.2抑制消减杂交技术756.3RNA-seq技术836.4调控转录因子基因的microRNA预测876.5microRNA定量分析90第7章基因功能研究技术957.1超量表达技术957.2RNAi技术987.3亚细胞定位102第8章基因调控研究技术1058.1酵母双杂交技术1058.2双分子荧光互补技术1078.3免疫共沉淀技术1118.4蛋白质体外结合(pulldown)技术1148.5酵母单杂交技术1198.6双荧光素酶报告基因检测技术1238.7电泳迁移率变动分析(EMSA)技术1268.8染色质免疫沉淀(ChIP)技术130第9章CRISPR/Cas9基因组编辑技术1349.1靶点的选择与载体的构建1349.2靶点编辑效率的预评估1399.3遗传转化1429.4突变体的鉴定146第10章细胞工程技术14910.1离体快繁技术14910.2器官再生技术15110.3胚挽救育种技术15510.4多倍体检测技术158第11章转基因研究技术16111.1农杆菌介导的胚性愈伤组织的转基因技术16111.2农杆菌介导的不定芽培养技术16411.3农杆菌介导的体细胞胚瞬时转化技术——以葡萄体细胞胚为例16611.4基因枪法介导的洋葱表皮细胞瞬时转化技术169第12章植菌互作研究的可视化技术17212.1荧光蛋白标记17212.2碘化丙啶(PI)荧光染料染色17412.3台盼蓝染色17612.4苯胺蓝染色17812.5二氨基联苯胺(DAB)染色179主要参考文献182
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